VIBRIO CHOLERAE

Vibrio cholerae

Divisi     :               Bacteriaceae

Klas        :               Schizomycetes

Ordo      :               Eubacteriales

Famili    :               Vibrionaceae

Genus    :               Vibrio

A.      Morfologi

Bakteri ini bersifat gram negatif(-) , fakultatif anaerobik, bentuk sel batang dengan ukuran panjang antara 2-3 um, menghasilkan katalase dan oksidase ,dan bergerak dengan satu flagel pada ujung sel. Tidak memiliki kapsul dan tidak berspora.

 

B.      Sifat Biakan

Pada media TCBS Vibrio cholerae membentuk koloni yang konvek , halus dan bulat

,berwarna kuning. Bersifat aerobe dan tumbuh pada media sederhana(biasa). pH

optimum 7.8-8.0 dan tumbuh subur pada pH 9.2, tetapi mati dengan cepat oleh asam.

Oleh karena itu , biakan yang mengandung karbohidrat yang dapat diragikan dengan

cepat menjadi steril. pH alkalis dimaksudkan agar kuman-kuman enterik yang lain  tidak

dapat tumbuh. Suhu optimum 37.5⁰C.

 

A.      Media Pembiakan

1.Media Transport

Media Carry and Blaire

Komposisi :

Sodium thioglycollate                          1.5gram
Dinatrium fosfat                                      1.1gram
Natrium klorida                                        5 gram
Agar                                                                5 gram
Kalsium klorida (1%)                             10 ml
Disstiled air                                                990 ml

Cara pembuatan :

1.       Larutkan  1.5gram Sodium thioglycollate,1.1gram dinatrium fosfat, 5gram natrium klorida  dan 5 gram agar-agar dalam 990 ml aquades kemudian panaskan.

2.       Dinginkan sampai suhu ± 50⁰C dan tambahkan 10 ml larutan kalsium klorida 1%. 

3.       Sesuaikan pH 8.4.

4.       Tuang dalam tabung reaksi sebanyak 7-10 ml

5.       Sumbat mulut tabung dengan kapas

6.       Sterilkan pada alat autoclave 121⁰C selama 15 menit.

2.Media penyubur

Alkali Pepton Water 1%

Komposisisi :

Pepton                                 10 gram

Natrium klorida              10 gram

Aquadest                             1000 ml

 

Cara Pembuatan :

1.       Larutkan 10 gram NaCl dan 10 gram pepton dalam 1000 ml aquades.

2.       Panaskan dan aduk homogen sampai mendidih.

3.       Tuang dalam tabung reaksi ± 5 ml

4.       Sumbat mulut tabung dengan kapas

5.       Sterilkan pada autoclave 121⁰C selama 15 menit.

3.Media Selektif

Media selektif adalah media yang ditambah zat kimia tertentu yang bersifat selektif untuk mengisolasi mikroba tertentu dan menghambat pertumbuhan mikroba lain.

Media selektif untuk kuman Vibrio cholerae adalah media TCBS (Thiosulfat Citrate Billsalt Sucrose)

Media TCBS

Komposisi:

Sucrose                                20 gram

Dipeptone                          10 gram

Sodium Citrate                  10 gram

Sodium Thiosulfate         10 gram

Sodium Chloride               10 gram

Yeast Extract                      5   gram

Oxbile (Oxgall)                  5   gram

Sodium Cholate                3   gram

Ferric Citrate                       1  gram

 Bromothymol Blue         0.04 gram

Thymol Blue                       0.04 gram

Agar                                       14  gram

Aquades                              1000 ml

Cara Pembuatan :

1.       Timbang 88 gram bahan diatas kemudian larutkan  dalam 1000ml aquades

2.       Aduk hingga larut

3.       Didihkan dalam waterbath

A.      Pengertian Media

 Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat makanan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme untuk pertumbuhannya

B.      Klasifikasi Media

1. Medium berdasarkan konsistensi

Ø Medium padat yaitu media yang mengandung agar 15% sehingga setelah dingin media  menjadi padat. Contohnya : Urea, KIA,Citrat,TSIA

Ø Medium setengah padat yaitu media yang mengandung agar 0,3-0,4% sehingga menjadi sedikit kenyal, tidak padat, tidak begitu cair. Media semisolid dibuat dengan tujuan supaya pertumbuhan mikroba dapat menyebar ke seluruh media tetapi tidak mengalami percampuran sempurna jika tergoyang. Contohnya : SIM

Ø Medium cair yaitu media yang tidak mengandung agar, contohnya adalah NB (Nutrient Broth), LB (Lactose Broth),TSB (Trypticase Soy Broth)

2. Medium berdasarkan komposisi

Ø Medium sintesis yaitu media yang komposisi zat kimianya diketahui jenis dan takarannya secara pasti, misalnya Glucose Agar, Mac Conkey Agar.

Ø Medium semi sintesis yaitu media yang sebagian komposisinya diketahui secara pasti, misanya PDA (Potato Dextrose Agar) yang mengandung agar, dekstrosa dan ekstrak kentang. Untuk bahan ekstrak kentang, kita tidak dapat mengetahui secara detail tentang komposisi senyawa penyusunnya.

Ø Medium non sintesis yaitu media yang dibuat dengan komposisi yang tidak dapat diketahui secara pasti dan biasanya langsung diekstrak dari bahandasarnya, misalnya Tomato Juice Agar, Brain Heart Infusion Agar, Pancreatic Extract.

3. Medium berdasarkan tujuan

Ø Media isolasi

Media ini mengandung semua senyawa esensial untuk pertumbuhan mikroba, misalnya Nutrient Broth, Blood Agar.

Ø Media selektif/penghambat

Media yang selain mengandung nutrisi juga ditambah suatu zat tertentu sehingga media tersebut dapat menekan pertumbuhan mikroba lain dan merangsang pertumbuhan mikroba yang diinginkan. Contohnya adalah TCBS,Thayer Martin

Ø Media diperkaya (enrichment)

Media diperkaya adalah media yang mengandung komponen dasar untuk pertumbuhan mikroba dan ditambah komponen kompleks seperti darah,serum, kuning telur. Media diperkaya juga bersifat selektif untuk mikroba tertentu. Misalnya Blood Tellurite Agar, Bile Agar, Serum Agar.

Ø Media diferensial

Media ini bertujuan untuk mengidentifikasi mikroba dari bakteri lainnya yang sama-sama tumbuh dalam media perbenihan berdasar karakter spesifik yang ditunjukkan pada media diferensial,misalnya TSIA (Triple Sugar Iron Agar) yang mampu memilih Enterobacteria berdasarkan bentuk, warna, ukuran koloni dan perubahan warna media di sekeliling koloni, media Mac conkey agar merupakan media diferensial dan slektif karena tidak dapat menumbuhkan bakteri gram positif.